熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。主要用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光。
熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態(tài)特征,具有熒光顏色和亮度。在判斷結(jié)果時(shí),要結(jié)合起來作出的判斷。結(jié)果是根據(jù)主觀指標(biāo),即工人的眼睛來記錄的。作為一般的定性觀測,它基本上是的。隨著科技的發(fā)展,客觀指標(biāo)被用來記錄判斷結(jié)果,如使用細(xì)胞分光光度計(jì)、圖像分析儀等儀器。但是,這些文書所記錄的結(jié)果也要與主觀判斷相結(jié)合。
攝影對于記錄熒光圖像是非常必要的。由于熒光容易褪色和減弱,因此有必要對實(shí)時(shí)照相的結(jié)果進(jìn)行記錄。該方法與普通顯微攝影方法基本相同。只需使用高速光敏膜,如ASA200或以上或24。上面。由于紫外光對熒光的猝滅效應(yīng)很大,如熒光標(biāo)記物FITC等,在紫外光照射30s時(shí),熒光亮度下降了50%,因此曝光速度太慢,無法捕捉到熒光圖像,一般有半自動(dòng)或全自動(dòng)顯微攝影系統(tǒng)。
下面要為大家介紹的是熒光顯微鏡的使用注意事項(xiàng):
①嚴(yán)格按照操作說明書的要求制造的熒光顯微鏡,不改變該程序。
②檢查應(yīng)在暗室進(jìn)行。進(jìn)入暗室后,接通電源,點(diǎn)燃超高壓汞燈5-15分鐘。當(dāng)光源發(fā)出強(qiáng)光并穩(wěn)定下來時(shí),眼睛有效適應(yīng)暗室,然后開始觀察標(biāo)本。
③為防止紫外線對眼睛造成損害,調(diào)節(jié)光源時(shí)戴防護(hù)眼鏡。
④每次檢查時(shí)間為1~2h,超過90min,超高壓汞燈的發(fā)光強(qiáng)度逐漸降低,熒光降低;紫外線照射3~5分鐘后熒光降低。因此,不超過2~3h。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解熒光顯微鏡。更多關(guān)于熒光顯微鏡的歡迎來電咨詢顯微鏡廠家。